В 1993 году компания Waters приняла решение инвестировать средства в разработку и синтез хроматографических частиц и стала одной из первых компаний, производящих свои собственные сорбенты. Способность производить свои материалы принесла ряд преимуществ: улучшение воспроизводимости финального продукта от партии к партии, от года к году, гибкость в развитии и представление новых инновационных технологий для поддержки увеличивающихся требований к хроматографическим разделениям.
Внизу представлены последние инновационные разработки фирмы Waters в области хроматографических частиц.
ACQUITY UPLC Технология частиц
Меньшие частицы обеспечивают не только увеличение эффективности, но и возможность работы при увеличенной линейной скорости без потери эффективности, увеличивая одновременно и скорость, и разрешение. Эффективность – это главный параметр разделения и для UPLC, поскольку он зависит от тех же величин селективности и удерживания, что и для ВЭЖХ. Однако создание маленьких частиц − это еще не создание частиц для UPLC-анализа. Хотя высокоэффективные непористые 1,5 мкм частицы коммерчески доступны, они страдают недостатком – низкой поверхностной площадью, которая приводит к плохой емкости и разрешению. Для поддержания параметров удержания и емкости на уровне ВЭЖХ, UPLC должна использовать современные пористые частицы, которые могут выдерживать высокие давления. Силикагелевые частицы имеют хорошую механическую прочность, а также большое число недостатков, которыми являются хвостизм основных анализов и ограниченный диапазон pH. Другая альтернатива – полимерные колонки – могут преодолеть ограничение рН, но имеют свои собственные недостатки, включая низкую эффективность и ограниченную емкость. Компания Waters создала два вида высокоэффективных, устойчивых при высоком давлении UPLC частиц: частицы 1.7 µm Ethylene Bridged Hybrid (BEH) и частицы 1.8 µm High Strength Silica (HSS).
Первые созданные ACQUITY UPLC® частицы были 1.7 µm Ethylene Bridged Hybrid (BEH) частицы. Второе поколение гибридных частиц является одним из ключевых моментов технологии UPLC и доступны в пяти видах колоночной химии: C18, C8, Shield RP18, Phenyl, HILIC.
Так как это гибридные частицы, широкий спектр значений pH (pH от 1 до 12) делает развитие метода легким и быстрым. BEH-частицы также доступны в размерах ВЭЖХ (2.5, 3.5, 5 и 10 мкм) в колонках XBridge™, таким образом обеспечивая быстрый перенос методов между ВЭЖХ и UPLC разделениями.
Новые UPLC частицы компании Waters − частицы 1.8 µm High Strength Silica (HSS). Данные частицы разработаны с еще большей механической прочностью, необходимой морфологией, обеспечивающей долгую жизнь колонок и UPLC эффективность при давлении 15000 psi (1000 Бар). Частицы 1.8 µm UPLC HSS разработаны и протестированы специально для UPLC разделений и доступны в двух вариантах колоночной химии: Т3, водная подвижная фаза, совместимая с фазой C18, разработана для разделения полярных органических соединений, похожи на Atlantis® T3 ВЭЖХ колонки. Новейшая UPLC фаза, ACQUITY UPLC HSS C18 обеспечивает потрясающий вид пиков, увеличивает время удержания и значительно продлевает жизнь колонок при низких значениях pH.
Waters является единственным производителем, предлагающим два вида UPLC сертифицированных частиц.
BEH Технология
В 1999 году компания Waters выпустила первое поколение гибридных частиц, называемых XTerra®, которые объединяют лучшие свойства как силикагелевых, так и полимерных колонок: супермеханически прочны, высокоэффективны, стабильны при высоких значениях pH.
Однако для обеспечения той механической стабильности, которая требуется для UPLC, в 2005 году было разработано второе поколение гибридных частиц, называемых BEH (Bridged Ethyl Hybrid ). Частицы размером 1,7 мкм имеют метильные мостики в каркасе, которые улучшают их механическую стабильность. BEH Technology™ является ключевой в обеспечении скорости, чувствительности и разрешения UPLC разделений.
BEH частицы: Ключ к технологии UPLC
ACQUITY UPLC (HSS) частицы
Так как технология UPLC используется в мире все больше и больше, Waters продолжила разработки в области создания новейших частиц, соответствующих новым требованиям UPLC, и создала новые UPLC частицы − 1.8 µm High Strength Silica (HSS). Данные частицы разработаны с еще большей механической прочностью, необходимой морфологией, обеспечивающей долгую жизнь колонок и UPLC эффективность при давлении 15000 psi (1000 Бар). Частицы 1.8 µm UPLC HSS разработаны и протестированы специально для UPLC разделений.
Тестирование давлением − устойчивость UPLC частиц
Компания Waters проводила специальный тест на прочность частиц, упакованных в колонку, пускался поток подвижной фазы. Как только поднималось давление, все частицы разрушались, кроме частиц Waters BEH и HSS, которые являются на сегодняшний день единственными коммерчески доступными, работающими с высочайшим давлением, необходимым для UPLC.